1、營(yíng)養(yǎng)鹽、緩沖劑、菌種溶液（浸泡24小時(shí)以上待用，低溫天氣浸泡48小時(shí)），三種溶液放置在培養(yǎng)箱中，蒸餾水20℃恒溫放置2小時(shí)。
2、稀釋接種液配置：取1000ml容量瓶1 支，加入 3ml 營(yíng)養(yǎng)鹽溶液（取前搖勻），1ml 緩沖液，15ml 菌種溶液（取上清液），用蒸餾水定容至1000ml待用。（三種溶液所需蒸餾水均需20℃恒溫2h后配置）
3、標(biāo)液配置：取 1000ml 容量瓶，先加入以上稀釋接種液 500ml 左右，將整瓶標(biāo)物（用稀釋接種液蕩滌試劑瓶）加入容量瓶，搖勻，待完全溶解后用剩余稀釋接種液定容至 1000ml。
4、水樣配置：取1000ml水樣（用前放置溫度達(dá)到20℃）加入 3ml營(yíng)養(yǎng)鹽溶液（取前搖勻），1ml 緩沖液，1-10ml菌種溶液：（取上清液），水樣中細(xì)菌含量較少時(shí)，視情況而定。
5、調(diào)節(jié)標(biāo)液PH 值：將水樣倒入燒杯中，用滴管逐漸滴加氫氧化鈉溶液（5g 溶入 50ml 純水），用試紙條測(cè)試至 PH=7.2（6.7-7.5）
6、取 200ml 標(biāo)液（實(shí)際樣品按預(yù)判濃度選擇對(duì)應(yīng)的取樣體積）加入棕色培養(yǎng)瓶，并放入攪拌子，（此時(shí)不放藥劑杯 、敞口），放入培養(yǎng)箱 攪拌曝氣1 小時(shí)。
7、取出培養(yǎng)瓶，放入藥劑杯，在藥劑杯中加入3-4片（3-4勺）氫氧化鈉片狀（顆粒） （勿掉入待測(cè)液中），“設(shè)置測(cè)試參數(shù)”界面，設(shè)置測(cè)試終端水樣量（例如：200ml）、培養(yǎng)天數(shù)（5天）、恒溫延時(shí)改至2小時(shí)等參數(shù)后點(diǎn)擊開始測(cè)量，置入培養(yǎng)箱開始測(cè)定。
8、測(cè)試頭必須和培養(yǎng)瓶擰緊，無(wú)漏氣。
9、觀察前2天測(cè)試結(jié)果變化，前2-3天濃度會(huì)大幅度上升，后2天濃度趨于平穩(wěn)。
10、當(dāng)環(huán)境溫度與實(shí)驗(yàn)溫度差距較大時(shí)，可以適當(dāng)延長(zhǎng)恒溫時(shí)間，以便水樣達(dá)到測(cè)定溫度。